国家試験問題
臨床検査技師国家試験 第65回 問109
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PCR産物のアガロースゲル電気泳動で非特異的なバンドが見られた場合、対応 法として試みるべきなのはどれか。
正解と解説
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正解 5
アニーリング温度を上げる。
PCRで非特異的なバンドが出現する場合、プライマーが鋳型に対して過度に緩く結合していることが原因となりやすいため、アニーリング温度を上げて特異性を高める対応が有効である。サイクル数やMg2+濃度、プライマー量、サンプル量を増やす操作はむしろ非特異的増幅を助長する方向に働く。