臨床検査技師国家試験 第70回 問108

アニーリング温度はプライマーのTm値以下に設定する。

PCR法ではアニーリング温度をプライマーのTm値以下に設定するのが基本であり、これにより特異的なプライマー結合を得る。Tm値が低いと非特異的結合が増え特異性は低下し、プライマー濃度は通常μMオーダーの低濃度で用い、増幅しにくい場合はアニーリング温度を下げて対応し、プライマーのGC含有量は40〜60%程度が望ましいとされる。