物理
薬剤師国家試験 第103回 問119
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未知タンパク質Xを分離精製し、その特性を解析した。 タンパク質Xを含む細胞抽出液(試料ア)をドデシル硫酸ナトリウムポリアク リルアミドゲル電気泳動(SDS–PAGE)及びサイズ排除クロマトグラフィー (SEC)により分析した。SDS–PAGE に際し、試料アに SDS と 2–メルカプトエ タノールを添加して前処理した(試料イ)。図 1 のレーンAは分子量が 25 kDa、 35 kDa、40 kDa、55 kDa の 4 種の分子量マーカータンパク質を示し、レーンBは 試料イを分離したときの泳動結果である。図 2 は精製したタンパク質X溶液(試料 ウ)と上記の 4 種の分子量マーカータンパク質を混合して分離したときのクロマト グラムである。以下の記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。 3 5 4 X 泳 吸 動 1 2 光 方 度 向 保持時間(分) A B 図 1 図 2
正解と解説
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正解 2, 3
SDS–PAGE において、タンパク質は陰極から陽極に向かって移動する。 / タンパク質Xの分子量は、40 kDa から 55 kDa の間である。
SDS処理されたタンパク質はSDSが結合することで強い負電荷を帯びるため、電気泳動では陰極側から陽極側へ向かって分子量に応じて移動する(選択肢2)。SDS–PAGEのゲル像(図1)においてタンパク質Xのバンドは分子量マーカーの40 kDaと55 kDaの間に位置していることから、その分子量はこの範囲にあると判断できる(選択肢3)。2–メルカプトエタノールはジスルフィド結合を切断する還元剤であり酸化的処理ではないため選択肢1は誤りである。