薬剤師国家試験 第108回 問114

二次元電気泳動は、等電点電気泳動と SDS ポリアクリルアミドゲル電気泳動 (SDS–PAGE)を組み合せたもので、ある生体試料中の多種多様なタンパク質をそ れぞれ固有の等電点と分子量の違いを利用して分離する方法である。図 1 と図 2 は、二次元電気泳動の概要と実験結果を示したものである。 図 1 等電点電気泳動: pH 4 ~ 10 の連続的な pH 勾配を形成させた棒状のゲル を準備する。このゲルを用いて電気泳動すると、試料中の各タンパク質はそれぞれ の等電点の位置までゲル中を移動する。 (注: 実際にはこの段階ではゲルは染色しないためタンパク質は見えないが、図 1 の下段では電気泳動後にタンパク質が等電点で分離しているイメージを示した。) 図 1 10 4 pH 勾配 一次元目の電気泳動後 (分離したタンパク質のイメージ) 図 2 SDS–PAGE: 等電点電気泳動により試料中のタンパク質を分離した棒状 ゲルを、SDS–PAGE の分離ゲルの上に移し、一次元目の等電点電気泳動と直角の 方向に電気泳動する。タンパク質は、その分子量に応じた位置まで移動する。 電気泳動の終了後、泳動用のガラス板から取り出したゲルを洗浄し、クマシーブ リリアントブルーでタンパク質を染色したところ、50 個のスポットを検出した。 図 2 中のスポットAは、等電点 5.8、分子量 56,000 のタンパク質である。 21 図 2 10 4 - 二 次 元 一次元目の棒状ゲル 目 の 電 気 泳 動 + 二次元目の電気泳動 10 9 8 7 6 5 4 - A 二 B 次 元 目 の 電 気 泳 動 + (染色したゲル) C このようなタンパク質分析法とその実験結果に関する記述のうち、誤っているの はどれか。1つ選べ。