生物
薬剤師国家試験 第101回 問118
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抗体A及び酵素標識抗体Bを用いる酵素免疫測定法(ELISA, enzyme-linked immunosorbent assay)による生体由来タンパク質Xの定量キットの説明書に、 以下のような測定原理を表す模式図があった。この図に関する記述のうち、正しい のはどれか。2つ選べ。 手順: 1 2 3 4 プレート タンパク質X 抗体A 抗体B(酵素標識抗体) 酵素 酵素基質 酵素反応生成物
正解と解説
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正解 3, 4
3において、抗体Aと抗体Bは、タンパク質Xの異なる部位に結合する。 / 3において、プレートの内面に抗体Bが結合するのを防ぐ必要がある。
サンドイッチELISA法では、プレートに固定した抗体Aとその後に加える酵素標識抗体Bが、測定対象タンパク質Xの互いに異なるエピトープ(部位)にそれぞれ結合することで特異的な検出が可能になる。抗体B添加の前段階では、プレート表面に非特異的に抗体Bが吸着してバックグラウンドが上昇するのを防ぐため、あらかじめブロッキング処理を行いプレート内面への非特異的結合を防止する必要がある。