薬剤師国家試験 第104回 問115

遺伝子Xの転写は薬物ア及びイにより促進される。両薬物による遺伝子Xの転 写促進に関わるプロモーター領域中の DNA 部位を同定するために、レポーター遺 伝子を用いたプロモーター解析実験を行った。以下に実験方法の概要を記す。 実験方法の概要 図 1 に示したように、遺伝子Xの転写開始点から 200 bp 上流(–200 bp)までの DNA を合成し、それをレポーター遺伝子に連結して発現ベクターを作製した (A)。また、Aより上流域が短い 4 種類の DNA を合成して、同様にベクターを 作製した(B~E)。次に、A~Eの組換え DNA を導入した哺乳動物由来細胞を 作製した。これらの細胞において薬物ア又はイで処理した際のレポーター遺伝子産 物を測定し、図 2 の結果を得た。レポーター遺伝子のみを持つベクターを導入した 細胞では、薬物処理の有無に関わらずレポーター遺伝子産物は発現されなかった。 なお、細胞への DNA 導入効率は等しく、細胞培養条件やレポーター遺伝子産物な どが転写活性に影響を及ぼさないことを確認している。 遺伝子Xのプロモーター領域 転写開始点 (~–200bp) –200 –160 –120 –80 –40 遺伝子X レポーター遺伝子 A レポーター遺伝子 B レポーター遺伝子 C レポーター遺伝子 D レポーター遺伝子 E 図 1 遺伝子Xのプロモーター領域を部分欠損した DNA を連結したレポーター遺 伝子ベクター(一部分)の模式図 20 2.5 :未処理 ]群理処未物薬の胞細入導A.sv[ :薬物ア処理 ).D.S+値均平(量現発的対相 2 の物産子伝遺ーターポレ :薬物イ処理 1.5 1 0.5 0 導入したベクター A B C D E 図 2 薬物ア及びイで処理した際のレポーター遺伝子産物の発現量 哺乳動物由来細胞における転写調節とプロモーター解析実験の方法及び考察に関 する記述のうち、誤っているのはどれか。1つ選べ。